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扫描电镜服务
关键词：扫描电镜服务
扫描电镜服务
一、服务介绍
扫描电镜是1965年发明的较现代的细胞生物学研讨工具，它具有制样简略、扩大倍数可调范围宽、图画的分辨率高、景深大等特色。近年来，扫描电镜已广泛地应用在生物学、医学、等学科的领域中。
二、实验原理
首要是通过发射电子聚焦光束来扫描样品的表面形状.电子束与样品表面的样子发生效果,发生多种能够被检测的信号,这些信号就包含了样品的表面形状和组成.染色。
三、实验流程
1. 样品的初步处理
a.取材样品面积可达8mm×8mm，厚度可达5mm。关于易弯曲的样品如血管、胃肠道粘膜等，可固定在滤纸或卡片纸上，以充沛暴露待调查的安排表面。
b.样品的清洗
(1)用等渗的生理盐水或缓冲液清洗；
(2)用5%的苏打水清洗；
(3)用超声震荡或酶消化的办法进行处理。
c. 固定
固定所用的试剂和透射电镜样品制备相同，常用戊二醛及锇酸双固定。由于样品体积较大，固定时间应适当延伸。也可用快速冷冻固定。
d. 脱水
样品经漂洗后用逐级增高浓度的酒精或丙酮脱水，然后进入中心液，一般用醋酸异戊酯作中心液。
2. 样品的枯燥
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a.空气枯燥法
空气枯燥法又称自然枯燥法，便是将通过脱水的样品，让其暴露在空气中使脱水剂逐步蒸发枯燥。这种办法的最大长处是简便易行和节省时间；它的首要缺点是在枯燥过程中，安排会由于脱水剂蒸发时表面张力的效果而发生缩短变形。因此，该办法一般只适用于表面较为坚固的样品。
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b. 冷冻枯燥法
(1)置于冷冻保护剂中：将样品置于冷冻保护剂中浸泡数小时。常用的冷冻保护剂为10%～20%二甲基亚砜水溶液，或15%～40%甘油水溶液。
(2)骤冷：将通过保护剂处理的样品迅速投入用液氮预冷至(150℃的氟利昂冷冻剂中，使样品中的水分很快冻结。
(3)枯燥：将已冻结的样品移到冷冻枯燥器内已预冷的样品台上，抽真空，经几小时或数天后，样品即到达枯燥。本办法不需要脱水，避免了有机溶剂对样品成分的抽提效果，不会使样品缩短，也是较早使用的办法。但是，由于花费时间长，消耗液氮多，简单发生冰晶损伤，因此未被广泛应用。
3. 样品的导电处理(真空镀膜法)
真空镀膜法是使用真空膜仪进行的。其原理是在高真空状态下把所要喷镀的金属加热，当加热到熔点以上时，会蒸发成极细小的颗粒喷射到样品上，在样品表面形成一层金属膜，使样品导电。喷镀用的金属材料应挑选熔点低、化学性能安稳、在高温下和钨不起效果以及有高的二次电子发生率、膜自身没有结构。现在一般选用金或金和碳。为了取得细的颗粒，有用铂或用金-钯、铂-钯合金的。金属膜的厚度一般为10 nm～20 nm。真空镀膜法所形成的膜，金属颗粒较粗，膜不够均匀，操作较杂乱并且费时，现在现已较少使用。
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4. 拍摄
四、客户提供
安排、细胞
五、公司提供
基本实验步骤、药品、样品处理、图片及图片分析
实验周期：3-4周
